|
|
| TUNEL 與 ELISA 檢測凋亡的方法比較 |
|
| 點擊次數：931 更新時間：2012-01-13 |
| |
TUNEL 與 ELISA 檢測凋亡的方法比較
TUNEL法
細胞凋亡中, 染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產生大量的粘性3'-OH末端，可在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶（TdT）的作用下，將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標記到DNA的3'-末端，從而可進行凋亡細胞的檢測，這類方法稱為脫氧核糖核苷酸末端轉移酶介導的缺口末端標記法（terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL）。由于正常的或正在增殖的細胞幾乎沒有DNA的斷裂，因而沒有3'-OH形成，很少能夠被染色。TUNEL實際上是分子生物學與形態學相結合的研究方法，對完整的單個凋亡細胞核或凋亡小體進行原位染色，能準確地反應細胞凋亡典型的生物化學和形態特征，可用于石蠟包埋組織切片、冰凍組織切片、培養的細胞和從組織中分離的細胞的細胞形態測定，并可檢測出極少量的凋亡細胞，因而在細胞凋亡的研究中被廣泛采用.
ELISA法測細胞凋亡
細胞凋亡時，Ca2+,Mg2+離子依賴的內源性核酸內切酶將雙鏈DNA從各核小體間連接區裂斷，產生單或寡合苷酸小體，各核小體的DNA與核組蛋白H2A,H2B,H3,H4形成緊密的復合物而對內源性核酸酶有抵抗使之不被內源性核酸酶裂解。主要使用單克隆抗DNA抗體和抗組蛋白抗體直接檢測DNA和組蛋白。
TUNEL 與 ELISA 檢測凋亡的方法比較
|
|
| |
|
|
