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MKN-45細(xì)胞,人低分化胃癌細(xì)胞操作步驟

點(diǎn)擊次數(shù):821 更新時間:2024-10-05
 

     在繼續(xù)探討MKN-45細(xì)胞,這一人低分化胃癌細(xì)胞系的操作步驟時,我們不得不強(qiáng)調(diào)其培養(yǎng)環(huán)境的精細(xì)調(diào)控對于細(xì)胞生長與實(shí)驗(yàn)結(jié)果的至關(guān)重要性。首先,確保培養(yǎng)基的配方精確無誤,通常MKN-45細(xì)胞使用含有10%胎牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)基,這有助于提供細(xì)胞生長所需的營養(yǎng)成分和生長因子。


     接下來,細(xì)胞的傳代操作需謹(jǐn)慎進(jìn)行。在無菌條件下,移除舊培養(yǎng)基,用預(yù)溫的PBS輕輕洗滌細(xì)胞一至兩次,以去除殘留的培養(yǎng)基和死細(xì)胞。隨后,加入適量含EDTA的進(jìn)行消化,消化時間需根據(jù)細(xì)胞貼壁情況靈活調(diào)整,避免過度消化導(dǎo)致細(xì)胞損傷。待細(xì)胞邊緣開始變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶使細(xì)胞脫落,加入適量新鮮培養(yǎng)基終止消化,并通過移液管輕柔吹打形成單細(xì)胞懸液。


    在細(xì)胞計數(shù)后,按照適當(dāng)?shù)谋壤龑⒓?xì)胞懸液接種到新的培養(yǎng)瓶中,注意控制細(xì)胞密度,避免過密導(dǎo)致生長抑制或過疏影響細(xì)胞間的相互作用。接種后,輕輕搖晃培養(yǎng)瓶使細(xì)胞均勻分布,并置于37°C、含5% CO?的恒溫培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。


    此外,對于MKN-45細(xì)胞系的長期保存,可采用液氮凍存法。在細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,進(jìn)行凍存前處理,包括消化、離心收集細(xì)胞,并使用含有DMSO的凍存液重懸細(xì)胞。隨后,將細(xì)胞懸液分裝至凍存管中,按照梯度降溫的方式逐步放入4°C、-20°C、-80°C冰箱,最終轉(zhuǎn)移至液氮罐中長期保存。


   通過上述細(xì)致的操作步驟,我們可以有效維持MKN-45細(xì)胞的活性與穩(wěn)定性,為后續(xù)的科學(xué)研究提供可靠的實(shí)驗(yàn)材料。


 
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