elisa酶聯(lián)免疫試劑盒的影響因素有哪些？ 1、固相載體
可溶性抗原或抗體吸附于固相載體而成為不溶形式，這是進行酶標記測定的基本條件。許多物質可作為固相載體，但在elisa酶聯(lián)免疫試劑盒中常用的是聚苯乙烯或聚氯乙烯微量反應板及塑料管。
每批制品在使用前，須經(jīng)過實驗室鑒定，鑒定的方法和標準是對每批購置的微量反應板或塑料管抽樣，用0.2ug/ml純化的正常人IgG進行包被，經(jīng)洗滌后加酶標記抗人球蛋白進行反應，再經(jīng)孵育洗滌，加底物顯色終止反應后，逐孔在酶標比色計中測定其消光值、光密度（OD值）。
一般認為全板中每兩孔間OD值的誤差不超過10%為合格。如果中間孔與四周孔OD值相差太大，或者反應板的這一邊與另一邊凹孔的OD值相差大，均不合格。此外，還要檢查陽性和陰性參考血清OD值是否有明顯差別。一般要求有10倍左右的差異為合格。
2、抗原
在ELISA中，包被于固相載體表面的抗原或抗體的來源和制備方法對試驗結果都有影響。包被所用的抗原必須是可溶性的，且要求是和穩(wěn)定的制劑，純度和免疫原性要高。而且抗原包被固相載體除濃度外，對時間、溫度、PH均有關系。
溫度高（如37℃、45℃、或56℃），包被時間可縮短，溫度低可延長包被時間。但為了方便起見，通常采用4℃包被過夜，可使抗原吸附得更加*且均勻。
在用聚苯乙烯或聚乙烯微量反應板或塑料管作固相載體時，在堿性條件下（如0.1mol/L、PH9.6碳酸鹽緩沖液稀釋抗原）4℃包被過夜較為合適。
但在某些試驗中，如用LPS或毒素蛋白包被時，用PH7.2～7.4PBS稀釋才是滿意的。包被特異蛋白質的濃度為1～10ug/ml，而對某些病原微生物抗原以5～20ug/ml較為合適，但均應通過滴定。
